Εφαρμογή της χρωμογονικής τεχνικής στη δοκιμή βακτηριακών ενδοτοξινών

Η χρωμογονική τεχνική είναι μεταξύ των τριών τεχνικών που περιέχουν επίσης τεχνική gel-clot και θολόμετρη τεχνική για την ανίχνευση ή τον ποσοτικό προσδιορισμό ενδοτοξινών από Gram-αρνητικά βακτήρια χρησιμοποιώντας κυτταρόλυμα αμοιβαιοκυττάρων που εξάγεται από το μπλε αίμα του καβουριού πετάλου (Limulus polyphemus ή Tachypleus tridentatus).Θα μπορούσε να ταξινομηθεί ως προσδιορισμός χρωμογόνου τελικού σημείου ή κινητικός-χρωμογονικός προσδιορισμός με βάση τη συγκεκριμένη αρχή προσδιορισμού που χρησιμοποιείται.

Η αρχή της αντίδρασης είναι ότι: το προϊόν λύσης αμεβοκυττάρων περιέχει έναν καταρράκτη ενζύμων πρωτεάσης σερίνης (προένζυμα) που μπορούν να ενεργοποιηθούν από βακτηριακές ενδοτοξίνες.Οι ενδοτοξίνες ενεργοποιούν τα προένζυμα για να παράγουν ενεργοποιημένα ένζυμα (που ονομάζονται κοαγκουλάση), το τελευταίο καταλύει τη διάσπαση του άχρωμου υποστρώματος, απελευθερώνοντας ένα κίτρινο προϊόν pNA.Το απελευθερωμένο pNA μπορεί να μετρηθεί φωτομετρικά στα 405 nm.Και η απορρόφηση συσχετίζεται θετικά με τη συγκέντρωση ενδοτοξίνης, τότε η συγκέντρωση ενδοτοξίνης θα μπορούσε να ποσοτικοποιηθεί ανάλογα.


Ώρα δημοσίευσης: Σεπ-29-2019