Τι είναι το τεστ ενδοτοξινών;

Τι είναι το τεστ ενδοτοξινών;

Οι ενδοτοξίνες είναι υδρόφοβα μόρια που αποτελούν μέρος του συμπλέγματος λιποπολυσακχαριτών που σχηματίζει το μεγαλύτερο μέρος της εξωτερικής μεμβράνης των Gram-αρνητικών βακτηρίων.Απελευθερώνονται όταν τα βακτήρια πεθαίνουν και οι εξωτερικές μεμβράνες τους αποσυντίθενται.Οι ενδοτοξίνες θεωρούνται οι κύριοι παράγοντες που συμβάλλουν στην πυρετογόνο απόκριση.Και παρεντερικά προϊόντα μολυσμένα με πυρετογόνα μπορεί να οδηγήσουν σε ανάπτυξη πυρετού, πρόκληση φλεγμονώδους απόκρισης, σοκ, ανεπάρκεια οργάνων και θάνατο στον άνθρωπο.

Το τεστ ενδοτοξινών είναι το τεστ για την ανίχνευση ή τον ποσοτικό προσδιορισμό ενδοτοξινών από Gram-αρνητικά βακτήρια.

Τα κουνέλια χρησιμοποιούνται αρχικά για την ανίχνευση και τον ποσοτικό προσδιορισμό των ενδοτοξινών σε φαρμακευτικά προϊόντα.Σύμφωνα με το USP, το RPT περιλαμβάνει παρακολούθηση για αύξηση της θερμοκρασίας ή πυρετό μετά από ενδοφλέβια ένεση του φαρμακευτικού προϊόντος σε κουνέλια.Και το 21 CFR 610.13(b) απαιτεί δοκιμή πυρετογόνου σε κουνέλι για συγκεκριμένα βιολογικά προϊόντα.

Στη δεκαετία του 1960, ο Fredrick Bang και ο Jack Levin ανακάλυψαν ότι τα αμεβοκύτταρα του πεταλοειδούς καβουριού θα πήξουν παρουσία ενδοτοξινών.οLimulus Amebocyte Lysate(ή Tachypleus Amebocyte Lysate) αναπτύχθηκε αναλόγως για να αντικαταστήσει τα περισσότερα RPT.Στο USP, το τεστ LAL αναφέρεται ως δοκιμή βακτηριακής ενδοτοξίνης (BET).Και το BET θα μπορούσε να γίνει χρησιμοποιώντας 3 τεχνικές: 1) την τεχνική gel-clot.2) η θολωσιμετρική τεχνική.3)η χρωμογονική τεχνική.Οι απαιτήσεις για τη δοκιμή LAL περιέχουν βέλτιστο pH, ιοντική ισχύ, θερμοκρασία και χρόνο επώασης.

Σε σύγκριση με το RPT, το BET είναι γρήγορο και αποτελεσματικό.Ωστόσο, η BET δεν μπόρεσε να αντικαταστήσει πλήρως το RPT.Επειδή η ανάλυση LAL μπορεί να παρεμβάλλεται από παράγοντες και δεν είναι σε θέση να ανιχνεύσει πυρετογόνα που δεν είναι ενδοτοξίνες.